液相色譜儀梯度異常原因及處理方法

液相色譜儀梯度色譜圖出現(xiàn)保留時(shí)間變化、保留時(shí)間縮短、保留時(shí)間延長(zhǎng)、出現(xiàn)肩峰或分叉、峰拖尾和峰展寬等異常時(shí)，原因及處理方法如下：
一、液相色譜儀梯度保留時(shí)間變化
1、柱溫變化：配置柱恒溫，必要時(shí)需配置恒溫箱。
2、等度與梯度間未能充分平衡：至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱。
3、緩沖液容量不夠：用大于25mmol/L的緩沖液。
4、柱污染：每天沖洗柱。
5、柱內(nèi)條件變化：穩(wěn)定進(jìn)樣條件，調(diào)節(jié)流動(dòng)相。
6、柱快達(dá)到壽命：用保護(hù)柱。
二、液相色譜儀梯度保留時(shí)間縮短
1、流速增加：檢查泵，重新設(shè)定流速。
2、樣品超載：降低樣品量。
3、鍵合相流失：流動(dòng)相PH值保持在3～7.5。
4、流動(dòng)相組成變化：防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀。
5、溫度增加：柱恒溫。
三、液相色譜儀梯度保留時(shí)間延長(zhǎng)
1、流速下降：管路泄漏，更換泵密封圈，排除泵內(nèi)氣泡。
2、硅膠柱上活性點(diǎn)變化：用流動(dòng)相改性劑（如三乙胺等）或堿致鈍化柱。
3、鍵合相流失：流動(dòng)相PH值保持在3～7.5。
4、流動(dòng)相組成變化：防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀。
5、溫度降低：柱恒溫。
四、出現(xiàn)肩峰或分叉
1、樣品體積過(guò)大：用流動(dòng)相配樣，總的樣品體積小于*峰的15%。
2、溶劑過(guò)強(qiáng)：用較弱的溶劑。
3、柱塌陷或形成短路通道：更換色譜柱，采用較弱腐蝕性條件。
4、柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效：更換燒結(jié)不銹鋼，加在線過(guò)濾器，過(guò)濾樣品。
5、進(jìn)樣器損壞：更換進(jìn)樣器。
五、液相色譜儀梯度峰拖尾
1、柱超載：降低樣品量，增加柱直徑，用較高容量的固定相。
2、峰干擾：清潔樣品，調(diào)整流動(dòng)相。
3、硅羥基作用：鈍化樣品。
4、死體積或柱外體積過(guò)大：連接點(diǎn)降至zui低，對(duì)所有連接點(diǎn)作適當(dāng)調(diào)整，盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管。
5、柱效下降：用較低腐蝕條件，更換柱，用保護(hù)柱。
六、峰展寬
1、進(jìn)樣體積過(guò)大。
2、在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展：進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散。
3、數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢：設(shè)定速率應(yīng)每峰大于10點(diǎn)。
4、檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)過(guò)大：設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感興趣*峰半寬的10%。
5、流動(dòng)相粘度過(guò)高：增加柱溫，用低粘度流動(dòng)相。
6、檢測(cè)池體積過(guò)大：用小體積檢測(cè)池，卸下熱交換器。
7、柱外體積過(guò)大：將連接管徑和連接管長(zhǎng)度降至zui小。
8、保留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
9、樣品過(guò)載。